ImageJ用于条带灰度值定量的用法

RT-PCR的条带定量，是基因表达量的比较和剪接水平的定量的非常好的办法。下面介绍一下主要操作步骤：

1. 导入胶图
2. 原始胶图一般是黑底的，所以要进行反向
3. 将图像进制转变为8bit；iff默认就是8bit的

然后进行正式的定量操作：

4. 用矩形框选目的条带，然后analyze->gels->select first lane，或者使用快捷键Ctrl+1

5. 然后拖动矩形框（不能重新绘制，因为要保证所有矩形框大小相同），到下一个条带的位置，analyze->gels->select next lane，或者使用快捷键Ctrl+2

6. 重复step 5，直至所有目的条带被框选
7. analyze->gels->plot lanes，或者使用快捷键Ctrl+3，绘制覆盖图

8. 使用魔法棒工具，对准峰图的位置，点击，即可获得该区域的覆盖度

在使用时，经常会遇到，峰图与X轴不能形成一个密闭的区域，导致选取区域错误。在出现这种情况时，可以使用直线工具，手动添加线条，形成一个密闭区域，但是要注意，线条添加尽可能合理，不要导致结果大量偏移初始值。